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sss小鳄鱼

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切缓冲液温度都不一样

我现在需要切一个载体连上片段,用的酶是MluI和BstBI,这两个没缓冲液和温度都不一样,有没有用过这两个酶酶切的朋友,切的时候是怎么操作,先切哪个呢?我想的操作是先100ul体系载体添加不超过3000ng,切MluI温度是37°,切4小时,缓冲液是buffer3.1,切两管,切完以后直接上柱子胶回收,两管合成一管,100ul体系再切BstBI,温度是65°,在pcr仪里切3.5小时,buffer是cutsmart,有没有懂得人看一下我的操作有没有问题,之前切的载体一直不行,跟片段一直连不上,感谢大家

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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