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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » ELISA测细胞上清液，怎么确定是药物作用每个细胞分泌变化引起的炎症因子变化？
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世界美乐

新虫 (正式写手)

[求助] ELISA测细胞上清液，怎么确定是药物作用每个细胞分泌变化引起的炎症因子变化？

药物刺激后，实验组和对照组细胞数量有很大差异，所以这样测出来的因子怎么排除是通过影响细胞增殖引起的炎症因子变化？确保是药物直接作用细胞？

目前想到的是：1通过不加血清或者低血清抑制增殖，从而保证细胞数量一致，但这样会不会影响细胞状态，分泌减少，2取了上清液以后再计算细胞数量，用上清液因子量/细胞数量，再比较，

不知各位大神有什么好办法，或者我想的办法可行吗？

@gyesang 发自小木虫Android客户端
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1楼 2020-12-22 21:50:18
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小仙女13

木虫 (著名写手)
我们这边做的都是对照组与实验组一起取上清做elisa

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2楼2020-12-22 21:58:29
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世界美乐

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 21:58:29
我们这边做的都是对照组与实验组一起取上清做elisa

想继续咨询您2个问题，1、你们取上清液时，实验组对照组细胞数量差异大吗？2还会做RT-PCR
之类的进行辅证确实在细胞内蛋白就有差异了？

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3楼2020-12-22 22:09:20
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小仙女13

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 世界美乐 at 2020-12-22 22:09:20
想继续咨询您2个问题，1、你们取上清液时，实验组对照组细胞数量差异大吗？2还会做RT-PCR
之类的进行辅证确实在细胞内蛋白就有差异了？
...

取了上清你是怎么确定细胞数变化很大呢？我们只取上清测定因子释放的量。
也做过你说的pcr，只是要求不同吧不是一个实验

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4楼2020-12-22 23:01:42
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小仙女13

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:01:42
取了上清你是怎么确定细胞数变化很大呢？我们只取上清测定因子释放的量。
也做过你说的pcr，只是要求不同吧不是一个实验
...

你都是一起种的板子，细胞数为什么会有差异？如果用药物处理导致差异不也是合理的？

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5楼2020-12-22 23:03:58
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世界美乐

新虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:03:58
你都是一起种的板子，细胞数为什么会有差异？如果用药物处理导致差异不也是合理的？
...

我做了细胞活性实验，加了药和不加药的相差30%多，ELISA测了做了预实验，因子确实有差异的，我想知道的是除了药物抑制细胞数量导致因子分泌减少外，看有没有可能是因为药物作用直接降低细胞本身的因子分泌，

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6楼2020-12-22 23:18:35
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世界美乐

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:03:58
你都是一起种的板子，细胞数为什么会有差异？如果用药物处理导致差异不也是合理的？
...

细胞铺板时的数据都是一样的

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7楼2020-12-22 23:19:41
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世界美乐

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-22 23:03:58
你都是一起种的板子，细胞数为什么会有差异？如果用药物处理导致差异不也是合理的？
...

细胞铺板时的数量都是一样的

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8楼2020-12-22 23:20:07
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小仙女13

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 世界美乐 at 2020-12-22 23:18:35
我做了细胞活性实验，加了药和不加药的相差30%多，ELISA测了做了预实验，因子确实有差异的，我想知道的是除了药物抑制细胞数量导致因子分泌减少外，看有没有可能是因为药物作用直接降低细胞本身的因子分泌，
...

没毛病吧？这不就是实验组对照组的区别吗？

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9楼2020-12-23 22:06:30
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世界美乐

新虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小仙女13 at 2020-12-23 22:06:30
没毛病吧？这不就是实验组对照组的区别吗？
...

举个例子，某药物一方面阻碍细胞繁殖，具有一定细胞抑制性这是有害的，同时也发现细胞分泌的胞外蛋白减少，这时就不好解释是因为他的毒性抑制了细胞繁殖，减少了细胞数量从而导致的炎症因子减少，还是本身就降低了细胞的分泌水平，

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10楼2020-12-24 00:00:48
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