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小顽货

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物回收 已有1人参与

PCR产物电泳凝胶有目的条带，产物回收检测浓度小于10ng，并且od值不在正常范围，但是电泳凝胶后出现目的条带，我可以继续做质粒吗

PCR产物回收


@youlinglyw @biostar2009 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2020-12-17 21:43:44
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
OD值正常范围是什么意思？
单从琼脂胶上看，你这个亮度的条带目测每孔有200ng DNA，纯度也不错。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-12-18 13:30:50
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小顽货

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-18 13:30:50
OD值正常范围是什么意思？
单从琼脂胶上看，你这个亮度的条带目测每孔有200ng DNA，纯度也不错。

DNA的od260比280和od260比230

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3楼2020-12-20 14:19:27
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小顽货 at 2020-12-20 14:19:27
DNA的od260比280和od260比230
...

260/280的比例提示DNA里可能有蛋白污染
260/230的比例提示DNA里可能有小分子污染
虽然说DNA是越纯越好，但实际操作中带些污染很常见，也很难说蛋白污染或小分子污染是不是会影响后续实验。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2020-12-20 15:16:19
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小顽货

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-20 15:16:19
260/280的比例提示DNA里可能有蛋白污染
260/230的比例提示DNA里可能有小分子污染
虽然说DNA是越纯越好，但实际操作中带些污染很常见，也很难说蛋白污染或小分子污染是不是会影响后续实验。...

但是浓度显示不足10ng，结果显示不是DNA

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5楼2020-12-20 17:24:30
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轩辕佑德

至尊木虫 (职业作家)
胶回收完会出现这种问题，只要条带单一大小正确就可以继续做酶切连接。

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Work hard，be kind,and amazing things will happen.
6楼2020-12-20 22:29:21
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