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新虫 (初入文坛)

[求助] DNA如何标记荧光染料 已有1人参与

RT,具体情况就是DNA是订制的,但是标记的荧光染料使我们自己合成的,可以修饰羧基,氨基,羟基这种集团,想问一下,一般DNA怎么标记这种荧光染料,对DNA和染料各自有什么要求,标记完成之后,又该怎么提取DNA用于接下来的实验呢,我需要液相就可以,浓度啥的怎么确认呢。
或者有什么文献可以参考吗?
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11233344

新虫 (初入文坛)

不知道顶顶有没有用,有大佬指点一下吗
2楼2020-12-10 11:14:41
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11233344

新虫 (初入文坛)

如果有公司要是能帮忙合成一下,也可以联系一下我,
3楼2020-12-10 15:38:15
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你们自己合成的染料可以修饰羧基的话,那么有可能标记上磷酸基,比如用EDC催化氨基可以和磷酸基在水溶液中反应
合成的时候让他们加上个磷酸基就可以了,一般情况下如果你什么都不说的话,合成出的DNA的5'和3'都是OH
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2020-12-11 13:21:23
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

另外,合成DNA的时候也可以让公司带上一个叠氮或炔烃,然后你们把自己的染料改造一下加上对应的基团,用点击反应偶联上。
猜想如果荧光染料是你们自己合成的话,你们实验室应该具有一定的化学合成基础,这种改造不在话下。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2020-12-11 13:25:35
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11233344

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-11 13:25:35
另外,合成DNA的时候也可以让公司带上一个叠氮或炔烃,然后你们把自己的染料改造一下加上对应的基团,用点击反应偶联上。
猜想如果荧光染料是你们自己合成的话,你们实验室应该具有一定的化学合成基础,这种改造不 ...

这些反应,都还听过,不知改造完之后,这些DNA怎么回收利用呢,有没有文献可以参考一下的,我们实验室主要是最近开始涉及这一块,还在查资料阶段,所以还算一片空白
6楼2020-12-21 14:55:08
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