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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 关于pLexA双杂交系统
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1823730

新虫 (小有名气)

[求助] 关于pLexA双杂交系统 已有1人参与

请问在诱导板上酵母生长特别慢，还不显蓝色，是怎么回事？？有没有用过这个系统的可以交流一下

@gyesang 发自小木虫Android客户端
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1楼 2020-12-07 11:29:42
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1823730 at 2020-12-07 17:01:53
谢谢您的帮助。我用的是pLexA酵母系统。用蓝白斑已经是最低的筛选方法了。关于酵母生长速度，实在是太慢了，4天过后甚至不能看到明显的生长。
...

用的是什么培基？sd二缺的吗？如果是自己配的，可以考虑买预混好的试一试，价格不是很贵。

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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2020-12-07 17:32:31
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蓝白斑往往是比较强的相互作用才能筛选出来。建议用三缺，四缺配合3AT或抗生素之类的来筛。这种筛选条件下，酵母如果不表达目的基因就必然得死，对酵母有一种生存压力，所以可以筛选出较弱的相互作用。
酵母在二缺或三缺板子上长得慢很正常。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-12-07 14:24:34
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1823730

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-07 14:24:34
蓝白斑往往是比较强的相互作用才能筛选出来。建议用三缺，四缺配合3AT或抗生素之类的来筛。这种筛选条件下，酵母如果不表达目的基因就必然得死，对酵母有一种生存压力，所以可以筛选出较弱的相互作用。
酵母在二缺 ...

谢谢您的帮助。我用的是pLexA酵母系统。用蓝白斑已经是最低的筛选方法了。关于酵母生长速度，实在是太慢了，4天过后甚至不能看到明显的生长。

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3楼2020-12-07 17:01:53
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1823730

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-07 17:32:31
用的是什么培基？sd二缺的吗？如果是自己配的，可以考虑买预混好的试一试，价格不是很贵。
...

谢谢。用的不是SD培养基，是用棉子糖和半乳糖作为碳源的。我目前用的就是公司混好的。

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5楼2020-12-07 20:53:49
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