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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » DNS法测淀粉酶和纤维素酶活 求助
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陪你淋雨

新虫 (小有名气)

[求助] DNS法测淀粉酶和纤维素酶活 求助 已有2人参与

请问有没有大神有测细菌胞外酶活淀粉酶活和纤维素酶活的具体测定方法  能不能分享一下
之前查验了文献 方法都有一点小差异  且这个dns试剂在配置过程中还有很多小问题 不溶解等 希望大神么有测过的分享一下好的经验和方法吧 谢谢
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1楼 2020-12-05 21:57:24
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高健永

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同学，你测了吗？我也有些问题，我们可以讨论一下吗
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2楼2020-12-14 20:08:15
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复旦研究院

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

取1mL酶液于试管中，70℃保温15min，迅速冷却后，在40℃下预热15min，然后加入2mL40℃预热好的1%可溶性淀粉，摇匀后40℃下反应5min，迅速冷却并加入4mL0.4M氢氧化钠终止反应，然后取1mL反应液于试管中，加入1mLDNS，沸水浴5min，迅速冷却，定容至15mL，520nm下测定OD值。
参比：将酶液用氢氧化钠灭活，然后加入淀粉，其他步骤相同。
空白：利用1mL蒸馏水代替1mL反应液，其他步骤相同。
酶活力单位定义：上述条件下底物在1min催化生产1μmol还原糖的酶量定义为一个酶活力单位U（绝干）。
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样品测试分析随时木虫私信我 :)
3楼2020-12-15 16:29:17
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陪你淋雨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 高健永 at 2020-12-14 20:08:15
同学，你测了吗？我也有些问题，我们可以讨论一下吗

可以 我私信你了

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4楼2020-12-19 09:57:00
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陪你淋雨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 复旦研究院 at 2020-12-15 16:29:17
取1mL酶液于试管中，70℃保温15min，迅速冷却后，在40℃下预热15min，然后加入2mL40℃预热好的1%可溶性淀粉，摇匀后40℃下反应5min，迅速冷却并加入4mL0.4M氢氧化钠终止反应，然后取1mL反应液于试管中，加入1mLDNS， ...

你好 请问你这个方法的计算方式是什么

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5楼2020-12-19 09:57:24
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TerryHLHL

铜虫 (小有名气)
测淀粉酶活有更简便的方法，直接用碘液就可以，如果你还需要的话回复我，我会把详细的方法贴出来

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6楼2021-01-29 04:02:20
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海韵楠馨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by TerryHLHL at 2021-01-29 04:02:20
测淀粉酶活有更简便的方法，直接用碘液就可以，如果你还需要的话回复我，我会把详细的方法贴出来

你好，能否分享一下你的实验方案，谢谢。我最近在测淀粉酶活性抑制率，在DNS上遇到了些问题。DNS染色后发现吸光度区别不大，试了很多方法都效果都不好
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7楼2021-04-03 16:32:30
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boogieeee

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by TerryHLHL at 2021-01-29 04:02:20
测淀粉酶活有更简便的方法，直接用碘液就可以，如果你还需要的话回复我，我会把详细的方法贴出来

您好，我也遇到了相同的问题，请问能分享一下您的方法吗？

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8楼2021-09-07 19:56:08
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