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beibei3372

金虫 (初入文坛)

[交流] 有关大肠杆菌BL21(DE3)

大肠杆菌BL21(DE3) 一般是用来表达的,我的质粒不需要表达只需要克隆的话,BL21(DE3)的修饰系统会对该质粒造成什么影响吗?
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mwgyanchu

铁杆木虫 (著名写手)


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质粒表达也要加诱导剂的,BL-21表达系统不会改变质粒的特性的。
2楼2009-07-24 16:01:49
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freshair33


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只需要克隆干嘛不用DH5a啊,通常克隆宿主对外源基因的稳定性比较好。
3楼2009-07-24 16:22:51
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chenliang_0513

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
BL21(DE3)是relA+的菌株,可能造成质粒内部重组,改变基因的稳定性,做克隆就不要用了。2楼说不会改变质粒的特性是不正确的。用来做克隆的菌株基本上都是relA—的,你自己去查查吧。DH5a,xl-gold,DH10-teba等
我本将心向明月,奈何明月照沟渠?
4楼2009-07-24 17:13:02
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36678293

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
bl21 是专们用力表达的,克隆的话,提取的质粒是很混乱的,建议不要使用,可以用专门的克隆菌株,如DH5A,GOLD JM109,et,al
5楼2009-07-24 22:01:30
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

应该没有影响
6楼2009-07-24 22:17:11
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yanlili

金虫 (正式写手)



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质量肯定没有克隆菌株的好,但是影响也不大吧
7楼2009-07-24 23:56:49
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shenqicc

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
以前我转化BL21后提出的质粒质量就明显不如从JM109里面提出来的效果好,建议克隆的话还是应该选择诸如JM109、DH5α之类的吧!~
Publish OR Perish!
8楼2009-07-25 01:17:34
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beibei3372

金虫 (初入文坛)

非常感谢哈!

谢谢大家的热心指导!!!
9楼2009-07-27 09:37:37
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