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elisa小问题求助
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| 免疫小白，老板突然给了我两篇paper让我研究用elisa测细胞因子， 现在有一个问题：取了脾组织然后制备了单细胞悬液以后，还需要再接着培养吗？ 还是直接稀释好浓度就可以当做sample用试剂盒做了？ 我们的实验目的应该是探究做完别的实验的老鼠免疫因子的表达情况， 因为我看paper里面他们有加pma和ionomycin再孵育，不知道需不需要这一步。 谢谢各位！！！ |
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fuyuandj86
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做成单细胞悬液是因为作者想要看看活细胞在pma之类药物刺激作用下的表达情况的变化，如果把细胞用ripa裂解了再往裂解液里加pma刺激是没用的。 怎么设计实验取决于你自己的实验目的，具体情况具体分析。 |
melodiouso
4楼2020-11-22 13:36:46
fuyuandj86
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2楼2020-11-21 14:40:22
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您好，谢谢帮助！我还是没有太明白想再详细问您： ① 我看到有的paper protocol会直接用ripa裂解液加上匀浆器处理脾然后提取上清接着测，有的paper就是如我上面所说 会制备成单细胞悬液并且控制好它的浓度，请问这两种方法都是可以的吗？②在单细胞悬液的这一种方法中，有一篇paper提到了加pma那些，我搜了一下好像是为了刺激免疫因子的产生，您的意思是在我实验的前提下（检测其他刺激或处理的影响）不需要加这些试剂对吗？ 期待您的回复！ 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2020-11-21 16:53:02
5楼2020-11-22 17:43:45