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36678293

铜虫 (正式写手)

[交流] 请教pCambia Vectors相关问题,谢谢赐教

各位师兄师姐:小弟初做转基因植物,想请教基本几个问题,还望不吝赐教:
1:pCambia Vectors载体上的两个CaMV35S启动子为什么长度不一样,一个是700多,而另外一个只有500多?
2:pVS1 sta 和rep的作用分别是什么?
3;如果我想转一个植物基因,需要在基因的外显子中间加入内含子吗?
谢谢!
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天

★ ★
36678293(金币+1):谢谢参与
36678293(金币+1,VIP+0): 7-24 00:39
看文献,这些都是最基本的,找国内外相关背景的文章读
海到尽头天做岸,山登绝顶我为峰。
2楼2009-07-24 00:24:18
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36678293

铜虫 (正式写手)

我要是有时间的话,肯定去查文献了,现在时间紧,没办法,求助,希望不要像楼上的那位一样,在这里装!
3楼2009-07-24 00:38:20
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
36678293(金币+1):谢谢参与
36678293(金币+1,VIP+0):谢谢 7-24 21:49
3;如果我想转一个植物基因,需要在基因的外显子中间加入内含子吗?
不用加intron,直接用从cDNA中扩增出来的全长连接到载体中即可
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
4楼2009-07-24 10:32:22
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36678293

铜虫 (正式写手)

自己顶起!
5楼2009-07-27 22:09:52
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gastrodia

金虫 (正式写手)

★
36678293(金币+1):谢谢参与
即使2个启动子的长度不同,依然是可以用的,所谓启动子就是结合RNA聚合酶进行转录起始的区域,可长可短,但短到一定程度就不能结合RNA聚合酶了,所以长一点是不怕的,所以你不必担心,如果你注意分析的话,你可以发现不同vector上面同一终止子的长度也是不同的
6楼2009-07-27 23:20:47
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gastrodia

金虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
至于第三个问题,直接使用cDNA就可以,当然你若能加上合适的intron,但是必须能够为转基因的宿主正确剪切才可以
7楼2009-07-27 23:22:12
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