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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 体外发酵的厌氧环境以及菌群问题，求解！
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哒哒的哒哒

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2020-11-14 13:12:30
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琴小糖

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.粪便里面的菌群有很多种，正常称量就可以，没那么容易死，如果担心，可以放个冰盒，保持低温称取；
2.到了时间停止反应，敞开瓶口冰浴不只是通氧，还有通过低温使菌体代谢降低而停止反应，如果要后续提取DNA先要看看你的提取方法对样品有什么限制，一般冰水浴，保持低温，尽快提取；
3.你的培养液中最好都是水溶物，因为培养后离心下来的是菌体，正是你要测的菌群；
4.如果能够保证样品培养液的均匀，这样做应该是没什么问题的，但是你以50mL为基础量，每次取10mL对你的培养体系影响应该挺大的，可以扩大体系或者减小取样量会好一点，或者还是统一配制接种后再分装
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2楼2020-11-17 11:44:05
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哒哒的哒哒

禁虫 (初入文坛)
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3楼2020-12-01 11:44:13
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琴小糖

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 哒哒的哒哒 at 2020-12-01 11:44:13
非常感谢！
还有个问题想请问您一下：
我如果用15mL的离心管反应，在每个管子里加入粪浆和样品还有培养基，共15mL；盖好盖子之后，平躺着放在厌氧发酵的盒子里，在里面放上产气包让盒子里保持厌氧环境。这样操作 ...

你用离心管装满液体为什么要躺着放，如果管子里面还有空气的话这样不是加大了液面与空气的接触范围吗；如果你要绝对无氧的环境的话用厌氧培养箱会方便很多，但是如果不是要绝对无氧的环境的话就这样操作，然后尽量排空管内空气，并保证液面面积尽量小，你师姐用针管就是这个道理，你可以试试你的管子不要盖太紧，用密封厌氧罐加产气包，配合里面放蜡烛或者可以燃的东西点燃然后密封，可以消耗里面的氧气。
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4楼2020-12-03 09:50:42
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