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【求助】请教一些有关可见光谱测试透过率的问题，谢谢！
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我们的样品为直径约1cm,厚度约0.2mm的透明硅胶薄片，要求用波长范围为440-800nm的可见分光光度计在空气中测量光谱透过率，然后换算成在盐溶液介质的值（盐溶液的折射率为1.336），分别计算平均透过率和透过率差值，“平均透过率平均透过率≥90％（试样在生理盐水中）光谱透过率差≤5％（试样在生理盐水中）”为合格。为测量样品，买了一台波长范围为300-1000nm的可见分光光度计，型号为721。公司内没有人做过光学方面的检测，所以在这里向各位前辈请教几个基础的问题，恳请大家提供专业解答。 1，调“0%”时，以空气为参比样品，即不要放入空的比色皿，是吗？ 2，调“0%”后，直接把样品用两面胶粘到比色皿槽上测透过率，而不用把样品放到比色皿，再把比色皿放入槽内，可以吗？ 3，我想在440-800nm波长范围内每隔若干波长间隔（如50nm）测量一次透过率，得出多个离散的透过率值，求和再除以数据个数，即为平均值，可以这样算吗，还是一定要弄出曲线算积分？ 4，如何用多个离散数据计算透过率差？能否提供计算公式和步骤？ 5，应该先把在空气中测量的透过率（T空）转换成在盐溶液中的透过率（T盐），再计算平均光谱透过率和透过率差；还是先计算平均透过率和透过率差，再转换成在盐溶液在的值？ 6，如何把空气中的透过率转换成在盐溶液中的透过率，能否提供公式的步骤？ |
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wingcat(金币+3,VIP+0):谢谢 7-23 21:30
燕尾蝶6830(金币+5,VIP+0):只有操作方法，没有计算公式，能不能提供一下计算方面的意见啊！谢谢啦！ 7-24 12:34
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燕尾蝶6830(金币+5,VIP+0):只有操作方法，没有计算公式，能不能提供一下计算方面的意见啊！谢谢啦！ 7-24 12:34
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721可见分光光度计仪器的使用方法 1． 在接通电源之前，电表的指针必须位于“0”刻线上，否则应旋动电表上的校正螺丝调节到位。 2． 打开比色皿室的箱盖和电源开关，使光电管在无光照射的情况下预热15分钟以上。 3． 旋转波长调节器，选择测定所需的单色光波长。选择适当的灵敏度，一般先将灵敏度旋钮至中间位置，用零点调节器调节电表指针至T值为0%处。若不能调到，应适当增加灵敏度。 4． 放入空白溶液和待测溶液，使空白溶液置于光路中，盖上比色皿室箱盖，使光电管受光，调节光量调节旋钮使电表指针在T值为100%处。 5． 打开比色皿室箱盖（关闭光门），调节零点调节旋钮使针在T值为0%处，然后盖上箱盖（打开光门），调节光量调节旋钮使指针在T值为100%处。如此反复调节，直到关闭光门进和打开光门时指针分别指在T值为0%和100%处为止。 6． 将待测溶液置于光路中，盖上箱盖，由此时指针的位置读得待测溶液的T值或A值。 7． 测量完毕后，关闭开关取下电源插头，取出比色皿洗净擦干，放好。盖好比色皿暗箱，盖好仪器。 注意事项 1． 使用比色皿时，只能拿毛玻璃的两面，并且必须用擦镜纸擦干透光面，以保护透光面不受损坏或产生斑痕。在用比色皿装液前必须用所装溶液冲洗3次，以免改变溶液的浓度。比色皿在放入比色皿架时，应尽量使它们的前后位置一致，以减小测量误差。 2． 需要大幅度改变波长时，在调整T值为0%和100%之后,应稍等片刻(因钨丝灯在急剧改变亮度后,需要一段热平衡时间)，待指针稳定后再调整T值为0%和100%。 3． 当被测溶液浓度太大时，可在空白溶液处加一块中性滤光片（所谓中性是指它们在很宽的波长范围内的透光率基本相同），其A值有0.5，1，和1.5三种。所谓A值为1是标称值，实际在1左右，须经使用的仪器在实际使用的波长下测定其实际数值，例如：测得吸光片的实际数值为0.95，在空白溶液处加此吸光片后，被测溶液在电表上的读数为0.74，则该溶液的实际值为： 0.74+0.95=1.69 4．根据溶液的含量大小选择不同光程长度的比色皿,使用权电表读数A在0.1~1之间，这样可以得到较高的准确度。 5． 确保仪器工作稳定，在电源电压波动较大的地方，应外加一个稳压电源。同时仪器应保持接地良好。 6． 在仪器底部有两只干燥剂筒，应经常检查。发现干燥剂失效时，应立即更换或烘干后再用。比色皿喑箱内的硅胶也应定期取出烘干后再放回原处。 7． 为了避免仪器积灰和沾污，在停止工作时，应用罩子罩住仪器。仪器在工作几个月或经搬动后，要检查波长的准确性，以确保仪器的正常使用和测定结果的可靠性。 |
2楼2009-07-23 14:53:44
3楼2009-07-23 16:02:08
4楼2009-08-25 10:16:58
