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定量PCR两步法和三步法请教
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我做定量PCR，目的基因均采用的是两步法,但是内参基因（actin beta）用两步法时标准曲线不好（样品跑出来溶解曲线正常，但是用扩增产物等倍数稀释后发现所有的标准曲线溶解曲线出现小峰，即引物二聚体，排除污染），开始不知道什么原因，最后换用三步法小峰消失。 我想请问的是： 目的基因采用两步法，内参基因采用三步法进行扩增，扩增条件不一致（但是同一基因所用条件完全一致），这样对结果影响大吗？ 谢谢解答! [ Last edited by 350784478 on 2009-8-4 at 15:36 ] |
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