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Tomorrow.

新虫 (小有名气)

[交流] 怎么避免大肠杆菌表达蛋白形成包涵体?已有4人参与

构建质粒,在大肠杆菌表达后,形成包涵体,超声很难超开,请问有没有什么解决的办法。目前是在18度下表达24到36个小时。

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泡沫12

新虫 (小有名气)


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换一种表达载体试试。我之前在大肠 杆菌系统纯化蛋白时,也会形成包涵体。

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2楼2020-10-18 16:45:51
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Tomorrow.

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 泡沫12 at 2020-10-18 16:45:51
换一种表达载体试试。我之前在大肠 杆菌系统纯化蛋白时,也会形成包涵体。

是载体的问题么?

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3楼2020-10-20 16:22:02
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junjieshao

禁虫 (小有名气)


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4楼2020-10-22 04:30:36
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分子小雪

新虫 (小有名气)


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换标签试试,我之前是his标签在包涵体,换gst标签就好了
5楼2020-10-27 13:46:07
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)


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换大一点的tag,如GST可增加可溶性,另外,降低诱导温度,降低IPTG浓度。不过这些也不能保证一定会可溶。
一个人可以不成功,但不可以不成长!
6楼2020-10-28 08:57:05
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