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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » pTargetF质粒消不掉
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KD369

新虫 (初入文坛)

[交流] pTargetF质粒消不掉

在用MG1655做基因敲除的时候，后面遇到pTargetF质粒消不掉，后来我接种菌液到5ml试管在42度下培养了8到9个小时，在吸取微量接种到新的含卡那的培养基培养了一晚上，第二天居然长起来了，按理来说消除掉了pcas质粒在卡那抗性下是长不出来的，想问问大家做这个实验的时候遇到这种情况怎么处理的啊？

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1楼 2020-10-15 17:28:49
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追寻1993day

新虫 (初入文坛)
★
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接菌的时候用白色枪头略微蘸一下就行，不用吸。
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2楼2020-10-20 09:00:06
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shaohua2011

木虫 (正式写手)
★
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pTagetF是iptg诱导消除，pcas是温度诱导消除。

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
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探讨真正的科研。
3楼2020-10-30 07:13:19
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HK驱魔者

铁虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
3楼: Originally posted by shaohua2011 at 2020-10-30 07:13:19
pTagetF是iptg诱导消除，pcas是温度诱导消除。

请问你遇到过消不掉的情况吗？

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4楼2021-11-03 21:50:11
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HUSTZHW

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到这个问题了，IPTG诱导怎么也脱除不了
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5楼2022-02-11 19:11:55
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HK驱魔者

铁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by HUSTZHW at 2022-02-11 19:11:55
我也遇到这个问题了，IPTG诱导怎么也脱除不了

建议检查平板抗性

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6楼2022-02-21 13:02:57
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