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[交流]
融合PCR长链片段消失了?
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我是按照两步pcr法做的,小片段960bp左右,大片段也就是质粒一部分(5100bp左右),小片段和大片段胶回收的, 20ul体系: 两个模版 200 ng 10mM dNTPs 1 ul 10*pfu buffer 2 ul fast pfu酶 0.5 ul 分子量都对,但就是跑3个循环、10个循环和16个循环,1000bp条带都对,但5000-6000bp区间啥也没有...... 发自小木虫IOS客户端 |
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