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TonyinYee

新虫 (初入文坛)

[交流] 融合PCR长链片段消失了?

我是按照两步pcr法做的,小片段960bp左右,大片段也就是质粒一部分(5100bp左右),小片段和大片段胶回收的,
20ul体系:
两个模版          200 ng
10mM dNTPs        1 ul
10*pfu buffer        2 ul
fast pfu酶          0.5 ul
分子量都对,但就是跑3个循环、10个循环和16个循环,1000bp条带都对,但5000-6000bp区间啥也没有......

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