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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 想请教各位大佬，酵母破碎之后显微镜多少倍可以看到是否破菌呢？
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追逐盛夏

金虫 (小有名气)

[交流] 想请教各位大佬，酵母破碎之后显微镜多少倍可以看到是否破菌呢？ 已有1人参与

如题，想请教各位大佬，酵母要用多少倍显微镜才可以辨别是否破碎成功呢？一般都是用什么方法破细胞壁纯化蛋白呢？高压可以的话需要多大压力呢？

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1楼 2020-09-07 21:52:13
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forhighbio

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1000bar压力足矣，测定上清液中释放的蛋白就可以了解破碎情况了。

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2楼2020-09-07 22:18:49
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追逐盛夏

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-09-07 22:18:49
1000bar压力足矣，测定上清液中释放的蛋白就可以了解破碎情况了。

您好 我想请教一下您是说用高压就可以吗 那需要破几次以保证全部破了吗 我才用组织碾磨仪 70秒开 10秒关 60Hz频率 做了 12个循还  过镍柱之后蛋白非常非常少 包括杂蛋白才0.15mg 我都怀疑是否破碎成功 想请教一下用刚才那个程序能完全破菌吗

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3楼2020-09-09 20:03:15
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forhighbio

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组织研磨仪破酵母细胞壁的能力是不够的，起码研磨半小时，还得注意加冰。高压均质仪只需要3-5分钟就可以全部破碎好了。

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4楼2020-09-11 10:33:16
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