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米小修

新虫 (小有名气)

[求助] 做qPCR 的目的基因没有做出来,内参CT值20,用定量的引物跑半定量有目的条带

请教一下各位大神,我做qPCR 的目的基因没有做出来,内参CT值20,用定量的引物跑半定量有目的条带,这是什么原因呢?该怎么解决?
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junjieshao

禁虫 (小有名气)

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2楼2020-09-03 05:26:37
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米小修

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by junjieshao at 2020-09-03 05:26:37
不知道你加的样品浓度多少,记忆中一般内参大概15以内。重复几次看看。
qPCR的酶可能效率没有一般的酶好,只是耐受迅速的温度变化。

反转录的样品大概加了200ng.我做的拟南芥,用的是actin做内参,这边实验室做的一般都是20左右。
我觉得可能是样品质量不高影响的,但是内参还可以,所以不知道哪里有问题。
3楼2020-09-03 08:32:12
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