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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 做qPCR 的目的基因没有做出来，内参CT值20，用定量的引物跑半定量有目的条带
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米小修

新虫 (小有名气)

[求助] 做qPCR 的目的基因没有做出来，内参CT值20，用定量的引物跑半定量有目的条带

请教一下各位大神，我做qPCR 的目的基因没有做出来，内参CT值20，用定量的引物跑半定量有目的条带，这是什么原因呢？该怎么解决？
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1楼 2020-09-02 19:44:26
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
2楼2020-09-03 05:26:37
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米小修

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by junjieshao at 2020-09-03 05:26:37
不知道你加的样品浓度多少，记忆中一般内参大概15以内。重复几次看看。
qPCR的酶可能效率没有一般的酶好，只是耐受迅速的温度变化。

反转录的样品大概加了200ng.我做的拟南芥，用的是actin做内参，这边实验室做的一般都是20左右。
我觉得可能是样品质量不高影响的，但是内参还可以，所以不知道哪里有问题。
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3楼2020-09-03 08:32:12
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