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杆状病毒系统表达的蛋白不分泌到胞外,怎么大规模纯化? 已有1人参与
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求有经验的大神: 我最近在做几个蛋白的杆状病毒表达系统,其中做了一个EGFP的蛋白作为阳性对照,前期试验很顺利,细胞观察到了明显的病变,而且在荧光显微镜下EGFP是有大量荧光的;但是在用SDS-page检测上清中蛋白表达时间的时候,并没有看到与对照细胞明显的差异条带,是我的蛋白都没有分泌到上清中,而是存在于胞内吗?如果是这样的话,能通过什么方法大量纯化呢?或者怎么改进让它分泌到胞外呢?(我前面添加了蜂毒信号肽序列和His-标签) |
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