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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » LAMP实验阴性也有扩增
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大头er_崽

新虫 (初入文坛)

[求助] LAMP实验阴性也有扩增

遇到的问题简直令我头秃，上周本来测试的一个引物好好的，只有加了模板的阳性才能扩增，阴性完美对照。

但是这周开始，这个引物也不行啦，阴性也开始出现扩增了，加了UDG也不能很好的解决。

我用的是钙黄绿素和HNB来显色的，所以没有开过盖子，大半个月显色问题终于解决，但是阴性开始扩增了，我要哭了，太难了，这个实验的污染也太重了，想请教各位大神，大佬，大好人们，大家有什么防污染的建议可以给到我吗？不胜感激啊，感激涕零啊！！！

还有就是这个2019-nCOV假病毒的N基因大家有好用的引物吗？我在网站上设计的五对引物的特异性都不是很好，还请各位大神，大佬，大好人帮帮我吧！！！谢谢啦！！！
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1楼 2020-08-26 09:25:56
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大头er_崽

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by junjieshao at 2020-08-26 21:53:01
lamp假阳性的确很多，不然这个技术出来几十年，没什么应用。

确实是啊，重复不上几次就都被污染了
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9楼2020-08-27 17:41:32
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Creek0501

铜虫 (初入文坛)
过段时间再做，消除污染的影响。试试GLAPD进行引物设计
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2楼2020-08-26 09:51:23
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大头er_崽

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Creek0501 at 2020-08-26 09:51:23
过段时间再做，消除污染的影响。试试GLAPD进行引物设计

谢谢朋友，GLAPD是可以进行LAMP引物设计的吗？我用的是那个PrimerExplore设计的，然后那个LOOP引物是自己设计的。
赞一下 回复此楼
3楼2020-08-26 10:02:12
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Creek0501

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 大头er_崽 at 2020-08-26 10:02:12
谢谢朋友，GLAPD是可以进行LAMP引物设计的吗？我用的是那个PrimerExplore设计的，然后那个LOOP引物是自己设计的。...

对，专门设计特异且通用的LAMP引物
赞一下 回复此楼
4楼2020-08-26 10:03:42
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