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大头er_崽

新虫 (初入文坛)

[求助] LAMP实验阴性也有扩增

遇到的问题简直令我头秃,上周本来测试的一个引物好好的,只有加了模板的阳性才能扩增,阴性完美对照。

但是这周开始,这个引物也不行啦,阴性也开始出现扩增了,加了UDG也不能很好的解决。

我用的是钙黄绿素和HNB来显色的,所以没有开过盖子,大半个月显色问题终于解决,但是阴性开始扩增了,我要哭了,太难了,这个实验的污染也太重了,想请教各位大神,大佬,大好人们,大家有什么防污染的建议可以给到我吗?不胜感激啊,感激涕零啊!!!

还有就是这个2019-nCOV假病毒的N基因大家有好用的引物吗?我在网站上设计的五对引物的特异性都不是很好,还请各位大神,大佬,大好人帮帮我吧!!!谢谢啦!!!
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大头er_崽

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Creek0501 at 2020-08-26 10:28:51
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31921040/...

感谢感谢,不胜感激
7楼2020-08-26 11:00:45
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Creek0501

铜虫 (初入文坛)

过段时间再做,消除污染的影响。试试GLAPD进行引物设计
2楼2020-08-26 09:51:23
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大头er_崽

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Creek0501 at 2020-08-26 09:51:23
过段时间再做,消除污染的影响。试试GLAPD进行引物设计

谢谢朋友,GLAPD是可以进行LAMP引物设计的吗?我用的是那个PrimerExplore设计的,然后那个LOOP引物是自己设计的。
3楼2020-08-26 10:02:12
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Creek0501

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 大头er_崽 at 2020-08-26 10:02:12
谢谢朋友,GLAPD是可以进行LAMP引物设计的吗?我用的是那个PrimerExplore设计的,然后那个LOOP引物是自己设计的。...

对,专门设计特异且通用的LAMP引物
4楼2020-08-26 10:03:42
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