24小时热门版块排行榜    

查看: 2728  |  回复: 4
【悬赏金币】回答本帖问题,作者南岸青栀W将赠送您 20 个金币

南岸青栀W

新虫 (小有名气)

[求助] NPN外膜测定实验 已有1人参与

需要使用NPN来测定细菌外膜破损情况,在配置NPN溶液时,在加入少量乙醇溶解NPN后,用HEPES/PBS/0.85 %进行稀释至工作浓度。但是在稀释过程中,溶液出现乳白色的浑浊,为啥?有什么解决方法吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyuan0929

金虫 (小有名气)

乙醇溶解NPN之后,当时浓度是多少?
2楼2020-08-26 09:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南岸青栀W

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-26 09:00:55
乙醇溶解NPN之后,当时浓度是多少?

现在是0.003 g NPN用680微升无水乙醇溶解,再加入10 毫升30 %DMSO,NPN最终浓度为1 mM,现在暂时配置到这里,NPN未出现白色浑浊,之后打算用30 %DMSO稀释至工作浓度40 微摩。实验是将细菌作为处理对象,请问会有影响吗?这个操作方法对吗?
3楼2020-08-26 15:47:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyuan0929

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 南岸青栀W at 2020-08-26 15:47:25
现在是0.003 g NPN用680微升无水乙醇溶解,再加入10 毫升30 %DMSO,NPN最终浓度为1 mM,现在暂时配置到这里,NPN未出现白色浑浊,之后打算用30 %DMSO稀释至工作浓度40 微摩。实验是将细菌作为处理对象,请问会有影 ...

怀疑你的NPN工作浓度太高了。
我查文献看到的NPN工作浓度是10μM。
https://www.nature.com/articles/s41598-017-17772-6
(20μM NPN工作溶液与OD600=1的标准菌液以1:1(v/v)混合)
https://cmdr.ubc.ca/bobh/method/ ... cence-measurements/
(1ml OD600=0.5的标准菌液加入20μl 0.5 mM NPN溶液)
https://www.sciencedirect.com/sc ... i/S0960852414008013
( The fluorescence emission of 3 mL cell suspension with and without sophorolipid mixed with NPN (final concentration of 10 μM) was recorded at the excitation wavelength of 355 nm.)
4楼2020-08-26 16:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南岸青栀W

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-26 16:25:59
怀疑你的NPN工作浓度太高了。
我查文献看到的NPN工作浓度是10μM。
https://www.nature.com/articles/s41598-017-17772-6
(20μM NPN工作溶液与OD600=1的标准菌液以1:1(v/v)混合)
https://cmdr.ubc.ca/bob ...

40 μM NPN溶液是工作加入时的浓度,实验终浓度为10  μM。在配置NPN母液(1 mM)时,它会变得浑浊,在稀释后会成澄清状态,但是这个浑浊会影响实验吗?我实验结果前后荧光数值变化不大,且没有任何趋势,为啥呢?请问您做过相关实验吗?想求助一下您。(。・ω・。
5楼2020-08-26 19:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 南岸青栀W 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +11 enenenhui 2026-03-13 12/600 2026-03-14 21:48 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +5 小熊joy 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:07 by peike
[教师之家] 焦虑 +5 水冰月月野兔 2026-03-13 7/350 2026-03-14 15:14 by 农药害害
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 材料调剂 +5 xxxcm 2026-03-08 8/400 2026-03-14 03:33 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂 +16 稻妻小编 2026-03-09 18/900 2026-03-14 02:00 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5 邱gl 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[硕博家园] 木虫好像不热闹了,是不是? +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
[考研] 求调剂,数一英一274分 +4 小菲会努力 2026-03-08 4/200 2026-03-09 12:40 by 一定上岸哟_
[教师之家] 交大前校长王树国:现在最先进的科技并不在大学实验室,而是在企业研究院 +4 zju2000 2026-03-08 6/300 2026-03-08 19:15 by zju2000
信息提示
请填处理意见