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w55w

木虫 (正式写手)

[求助] 求助-关于tn4001转座子 已有1人参与

各位老师好，请问各位老师，我的tn-4001转座子质粒有卡那抗性基因和荧光基因，我将他转入菌株后，筛选到了一些能在卡那抗性培养基中生长的菌株，但是pcr无法扩增到荧光基因。。。请问一下这是怎么回事?

谢谢各位老师!

@天使托 发自小木虫Android客户端
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1楼 2020-08-23 23:48:18
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zyz2007

金虫 (正式写手)
你原始菌株的抗生素抗性筛查过吗？

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2楼2020-08-24 07:43:19
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w55w

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zyz2007 at 2020-08-24 07:43:19
你原始菌株的抗生素抗性筛查过吗？

嗯嗯，原始菌株做了mic，卡那抗性敏感，在50ng/ml培养基中不长。。

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3楼2020-08-24 08:18:37
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wangyuan0929

金虫 (小有名气)
卡那霉素抗性和荧光基因哪个在上游哪个在下游，基因序列各有多大？
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4楼2020-08-25 09:53:08
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w55w

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-25 09:53:08
卡那霉素抗性和荧光基因哪个在上游哪个在下游，基因序列各有多大？

老师 卡那在上游

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5楼2020-08-25 17:37:49
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w55w

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-25 09:53:08
卡那霉素抗性和荧光基因哪个在上游哪个在下游，基因序列各有多大？

卡那大约1400bp 荧光大约700bp

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6楼2020-08-25 17:39:33
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wangyuan0929

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
w55w: 金币+70, ★★★很有帮助 2020-08-29 11:06:23
引用回帖:
6楼: Originally posted by w55w at 2020-08-25 17:39:33
卡那大约1400bp 荧光大约700bp
...

你有没有考虑过Tn4001转座子能转多长的插入序列？
我怎么记得不超过2kb呢？
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7楼2020-08-26 08:37:51
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w55w

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-26 08:37:51
你有没有考虑过Tn4001转座子能转多长的插入序列？
我怎么记得不超过2kb呢？...

嗯嗯 这个大小应该可以携带的，因为看过有人这样构建质粒同时也成功了。。。

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8楼2020-08-29 16:51:47
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