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w55w

木虫 (正式写手)

[求助] 求助-关于tn4001转座子 已有1人参与

各位老师好,请问各位老师,我的tn-4001转座子质粒有卡那抗性基因和荧光基因,我将他转入菌株后,筛选到了一些能在卡那抗性培养基中生长的菌株,但是pcr无法扩增到荧光基因。。。请问一下这是怎么回事?

谢谢各位老师!

@天使托 发自小木虫Android客户端
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zyz2007

金虫 (正式写手)

你原始菌株的抗生素抗性筛查过吗?

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2楼2020-08-24 07:43:19
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w55w

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zyz2007 at 2020-08-24 07:43:19
你原始菌株的抗生素抗性筛查过吗?

嗯嗯,原始菌株做了mic,卡那抗性敏感,在50ng/ml培养基中不长。。

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3楼2020-08-24 08:18:37
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wangyuan0929

金虫 (小有名气)

卡那霉素抗性和荧光基因哪个在上游哪个在下游,基因序列各有多大?
4楼2020-08-25 09:53:08
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w55w

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-25 09:53:08
卡那霉素抗性和荧光基因哪个在上游哪个在下游,基因序列各有多大?

老师 卡那在上游

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5楼2020-08-25 17:37:49
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w55w

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-25 09:53:08
卡那霉素抗性和荧光基因哪个在上游哪个在下游,基因序列各有多大?

卡那大约1400bp 荧光大约700bp

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6楼2020-08-25 17:39:33
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wangyuan0929

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
w55w: 金币+70, ★★★很有帮助 2020-08-29 11:06:23
引用回帖:
6楼: Originally posted by w55w at 2020-08-25 17:39:33
卡那大约1400bp 荧光大约700bp
...

你有没有考虑过Tn4001转座子能转多长的插入序列?
我怎么记得不超过2kb呢?
7楼2020-08-26 08:37:51
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w55w

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-26 08:37:51
你有没有考虑过Tn4001转座子能转多长的插入序列?
我怎么记得不超过2kb呢?...

嗯嗯 这个大小应该可以携带的,因为看过有人这样构建质粒同时也成功了。。。

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8楼2020-08-29 16:51:47
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