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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pET-32a携带标签大小究竟是多少？
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zswx1

[交流] pET-32a携带标签大小究竟是多少？

pET-32a携带的标签是只有6个组氨酸还是还有10KD左右的硫氧还蛋白？
我用它做表达，目的片段上没有终止子，酶切位点为EcoR I和Xho I
目的片段长度为420bp
所表达的蛋白大小究竟应该多少？
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1楼 2009-07-17 19:09:11
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xiewen83

木虫 (小有名气)

带着眼镜的“农民”
★
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我也不知道，学习一下！
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Venson
2楼2009-07-17 19:23:08
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zysshine

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
6个组氨酸和19KD左右的硫氧还蛋白再加上你的 目的蛋白
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3楼2009-07-18 18:28:22
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sin_007

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
载体上有Trx.Tag , His.Tag , S.Tag。 trx-tag 有12KD，2个HIS标签，每个有0.8KD，若你所表达序列有终止密码子的话，只表达一个his标签，s-tag有1.7KD，再加上你的目的序列所表达出来的蛋白就融合蛋白的总大小。
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4楼2009-07-19 08:37:29
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muchong5577

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有文献报道：加了his标签的表达蛋白在sds的时候分子大小会产生偏差。
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5楼2009-07-19 11:40:21
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我跑电泳看到的载体蛋白大概有16-17kd
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6楼2009-07-20 14:28:06
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ly888lsp

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
6个组氨酸和19KD左右的硫氧还蛋白再加上目的蛋白
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7楼2009-07-20 16:59:38
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