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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » GFP亚细胞定位
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豆子喔

新虫 (小有名气)
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GFP必须转入的是基因的CDS区吗 可以加入UTR区吗 起始密码子附近GC含量高 无法设置引物 可以增加3的倍数的UTR区吗

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1楼 2020-08-18 08:47:21
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)
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一般都是GFP融合在基因cds区的N端或C端，GC含量对PCR扩增影响不大。

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5楼2020-08-18 08:52:02
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豆子喔

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zxd95 at 2020-08-18 08:52:02
一般都是GFP融合在基因cds区的N端或C端，GC含量对PCR扩增影响不大。

主要是起始密码子10个碱基 tm就有8、90度 无法扩增产物

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6楼2020-08-18 08:53:31
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zxd95

至尊木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
6楼: Originally posted by 豆子喔 at 2020-08-18 08:53:31
主要是起始密码子10个碱基 tm就有8、90度 无法扩增产物
...

可以做pcr的，变性温度一般是94度，现在有的快速聚合酶是98度，肯定能够解开链的GC含量高，正向引物可以短一些。

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14楼2020-08-19 03:47:55
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
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15楼2020-08-19 04:56:00
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abc8765244082楼
2020-08-18 08:47   回复  
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rohdy3楼
2020-08-18 08:48   回复  
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zxd954楼
2020-08-18 08:49   回复  
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herethere7楼
2020-08-18 08:59   回复  
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南京百奥李勇8楼
2020-08-18 09:08   回复  
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我是触手怪9楼
2020-08-18 09:18   回复  
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sct7310楼
2020-08-18 09:20   回复  
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bjxhljsw11楼
2020-08-18 09:52   回复  
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tzynew12楼
2020-08-18 10:27   回复  
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yuying042113楼
2020-08-18 11:21   回复  
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