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芽孢杆菌发酵上清液中抑菌物质分析求助
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我最近在做芽孢杆菌发酵上清液中抑菌物质分析试验,用的是LB培养基培养芽孢杆菌,得到发酵液后离心弃菌体取上清液过0.22μm膜,得到含有菌体分泌抑菌物质的上清液。本来下一步是想通过一些显色反应(双缩脲、考马斯亮蓝啥的)初步确定下上清液中的抑菌物质是否为蛋白质或者多肽,然后接着用饱和硫酸铵法预先纯化该抑菌物质,但是突然想到一个问题,LB培养基里面不是本身就含有胰蛋白胨和酵母膏嘛,这两种物质应该是有蛋白质、氨基酸或者是肽类的成分在里面吧,那我上清液里面的显色反应怎么判断是培养基自身的还是抑菌物质造成的呢?后面再用硫酸铵沉淀,又怎么确定沉淀下来的是哪个蛋白呢。还望各位大佬不吝赐教下,指点迷津 |
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