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chengkun

金虫 (正式写手)

[交流] 请教一个问题

各位大侠,我想做定点突变,但是没有使用定点突变的试剂盒,而是用over-lap PCR。这种方法是根据要突变的位点,从突变位点处设计四条引物,将原全长基因分成了2段,这2段有部分重叠,然后以此2段为模板,经退火,将全长基因p出。我做了几次,但是总是无法得到最后的全长基因,不知有哪位大侠做过,指点一下!谢谢。

[ Last edited by amisking on 2009-7-17 at 13:26 ]
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wql1828

木虫 (小有名气)

helix

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是大片段引物吗!     我做过使用不对称pcr做的定点突变
2楼2009-07-17 13:17:00
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chengkun

金虫 (正式写手)

?

不对称PCR怎么做啊?
3楼2009-07-17 13:19:37
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wql1828

木虫 (小有名气)

helix

Google一下吧!!    简单的说就是一对引物中  一条引物的量远远大于另一条引物的量呗
4楼2009-07-17 13:37:04
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