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酵母单杂交相关实验问题
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酵母单杂交实验在验证转录因子与启动子互作 做的启动子片段全长有近3k片段,还有启动子缺失片段分别在1~2kb之间 目前有个头大的问题就是 做诱饵菌株鉴定的时候 InsetCheck Mix 扩增的话片段是1.35+启动子片段长,启动子缺失片段我都能在PCR鉴定中扩增出来,唯独全长启动子没办法扩增鉴定得到。 想问问大神是不是的改变一下PCR时间: 95℃,1min (1cycle) 98℃,10s;55℃,30s;68℃,2min(30cycle) |
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