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dynamicren

木虫 (著名写手)

[交流] 融合蛋白带Linker引物设计中Tm值相差极大怎么办

近来想做融合蛋白表达,通过(G4S)3作为蛋白之间的Linker,但在进行引物设计时发现加入这么长的一段接头序列后导致上下游引物的Tm值差异达到了二十几,带接头的下游引物Tm值都超过100了,一时不知如何是好,不知道各位在实验过程中碰到过类似的问题没有,希望能得到各位的及时回复交流.
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

Tm值超过100,我的个神,上下游引物Tm相差较大时,取较低那个-5 ℃,试试。
Thank-you,so-blue.
2楼2009-07-16 22:36:51
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dynamicren

木虫 (著名写手)

加了45个碱基的Linker序列,Tm当然升上去了

加了45个碱基的Linker序列,Tm当然升上去了
3楼2009-07-16 22:41:58
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