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安徒生九日

新虫 (初入文坛)

[交流] 酵母双杂互作疑问

求问大佬们,我之前做过一个基因x和我目标基因的双杂,x是连在pGADT7载体上转进Y187菌株,目标基因是连在pGBKT7载体上转进Y2H菌株,两个菌株mating后发现在SD/-Leu/-Trp/-His/AbA/x-α-gal的培养基上可以长出蓝色菌落,而对照——x基因的y187菌株与pGBKT7空载转进y2h的菌株mating后没有在这个培养基上长出菌落,且我的目的基因曾经验证过没有自激活活性。
然后当我做反交验证的时候——将x连在BD上转进y2h和目标基因连在AD上转进y187时进行mating,却发现又无法在同样的缺陷培养基上面长出菌落了。
一直以来搞不明白酵母双杂反交的意义所在,希望解答,感谢!

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