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sunbin1416

[交流] pcr拖带

求助解决pcr拖带的原因

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-15 at 22:37 ]
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1楼 2009-07-15 17:08:18
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stella0xhx

新虫 (小有名气)
模板不纯，特异性不好，提高退火温度，操作严谨些
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5楼2009-07-15 21:08:06
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查看全部 7 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
酶过多
离子强度不适
模板过多
引物特异性不好
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2楼2009-07-15 17:11:32
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
主要应该是特异性不高  
提高退火温度3-5度 试试
这个方法一般有效
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
3楼2009-07-15 17:37:26
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anik

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
模板不纯
Buffer不合适
退火温度偏低
酶量过多
dNTP、Mg2+浓度偏高
循环次数过多

解决方法：
纯化模板
更换Buffer
适当提高退火温度
适量用酶
适当降低dNTP和镁离子的浓度
减少循环次数
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-07-15 17:37:38
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查看全部 7 个回答
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