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求助：Western blot抗体如何选择？
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我想要检测大鼠某种组织中HSP70的变化情况，用Western blot的方法，想请教一下，一抗是否只能选择兔多克隆抗体，如果选择鼠单抗，那么二抗用抗小鼠的抗体是否会和和大鼠组织中的蛋白发生结合产生假阳性？ 选择对照抗体抗beta-actin、GAPDH、tublin哪个好？是否也只能是兔多抗？因为查了santa cruz的目录，发现兔抗beta-actin的抗体只有一种，显色条带位于15kDa左右，不是很理想，不知道该如何选择？抗actin的抗体是否也可用？actin和beta-actin是否都可以作为管家基因？ 头一次做这方面的实验，很迷惑，希望有经验的同志多多指教！  |
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2楼2009-07-15 17:10:50
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流！ 7-15 17:55
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下面是antibody0109 在生物秀上的解释觉得蛮好，你可以看看 如何选择合适的一抗？ 请先确定您检测样品的种属，然后查找相关产品，根据说明书上描述的“适用种属和实验方法”来确定合适的抗体。如果说明书中有明确您要检测的种属和实验方法均经过检测，则您可以放心地购买该产品。如果说明书中没有注明您用的种属和实验方法经过验证，则要仔细考虑是否购买。 如何选择合适的二抗? 针对一抗来源的二抗（比如一抗是小鼠来源的，二抗就要是抗小鼠的） 针对一抗Ig亚型的（比如一抗是IgM，二抗就要是抗IgM的抗体） 根据你实验的需要，选择二抗的标记类型。 也可以通过一抗说明书页面的“Related Products”来选择合适的二抗 |
3楼2009-07-15 17:43:19