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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞水平上基因编辑
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哟呵——

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞水平上基因编辑 已有1人参与

请问有做过Cas9 RNP复合物通过脂质体方式转染到昆虫细胞中的大佬么，通过该种转染方式后提取细胞基因组然后克隆送测序检测不到编辑效果是怎么回事儿呀？？？
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1楼 2020-07-14 21:10:15
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genemail

新虫 (小有名气)
首先Cas9转染成功了吗？

发自小木虫Android客户端
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2楼2020-07-16 23:10:45
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哟呵——

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by genemail at 2020-07-16 23:10:45
首先Cas9转染成功了吗？

如何确定是否转染成功了呀，有的文献里面说有些基因，通过该种方式不能够进行基因编辑，我在想通过脂质体转染，是否能够将Cas9蛋白导入到细胞核里面去发挥编辑效果啊，
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3楼2020-07-17 10:49:26
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
哟呵——: 金币+5 2020-07-18 17:13:13
本帖内容被屏蔽
4楼2020-07-18 05:18:49
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哟呵——

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by junjieshao at 2020-07-18 05:18:49
你是通过瞬时转染去看基因编辑成功了还是看cas9有没有表达？
如果要做瞬时转染编辑基因，一般采用带荧光标签的crispr系统，可以通过流式细胞仪筛选。
如果要做稳定细胞系（基因编辑），一般采用三抗生素系统，效果 ...

我只是想在细胞水平上验证通过转染Cas9蛋白和gRNA的复合物是否能够对该基因成功进行编辑，也相当于是看设计的gRNA的编辑效果吧
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5楼2020-07-18 17:16:34
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