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塞外雨

金虫 (著名写手)

[交流] 急求电泳图解

我将转化后的提的质粒和转化时用的质粒一起跑电泳,出现图中现象,从左至右的加样顺序为:转化所用质粒(1个泳道),转化后提取质粒(后4个)。我觉得这5条带应该在一样的位置才对啊,怎么不一样呢。另外,质粒还没构建过,只是想试试我的感受态行不行。谢谢帮忙。

[ Last edited by 塞外雨 on 2009-7-14 at 08:10 ]
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塞外雨

金虫 (著名写手)

帮帮忙吧,愁死了。
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2楼2009-07-14 08:39:19
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

质粒有不同的状态,在电泳时表现为不同的大小,要是想确定大小的话,建议找个酶单切一下,然后再跑。
金币是赌出来的
3楼2009-07-14 08:44:04
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的质粒有多大?我看他们相差很大的,应该不是因为不同状态所引起的!
一个人可以不成功,但不可以不成长!
4楼2009-07-14 08:47:02
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塞外雨

金虫 (著名写手)

大约6千bp吧
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5楼2009-07-14 08:53:47
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

泳道1在大分子量位置的也有带,两个主要构象
另外要加marker才能判断……
6楼2009-07-14 10:32:46
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高丹

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
强烈建议你用酶切一下,再加个Marker一起电泳进行比较。直接跑质粒不一定能说明问题,因为质粒有不同构象,比如线性的,环形的等等。。。每次提取质粒时方法的细微差别也会影响质粒的构象。在这个电泳图上虽然几个泳道不同,但不能说明质粒大小不同。
7楼2009-07-14 10:41:36
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jerryqpr

木虫 (正式写手)

小猪亲点的老公


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
转化的质粒相差比较大的说,不过楼主没有一个marker可以做一下对照么。

ps:楼主抽提质粒的技术不错啊,只看得到一条明显的带。
铁杵可以磨成针,木杵只能磨成牙签,有些事情不是努力可以改变的.
8楼2009-07-14 14:30:53
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zfszheng

新虫 (小有名气)

看图跟本就是两个质粒
9楼2009-07-14 14:51:15
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jlc0225

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
第一条带在与其他泳道相同的位置有条带,说明有相同的质粒;
第一条带与其他泳道位置不同的地方也有条带,且相差悬殊,说明有杂带;
杂带有可能是RNA或者不同状态的DNA(环状),可以加入RNase在跑电泳看下面的带是否还在。还在就不是RNA。
建议加入Marker跑电泳,这样清晰点。或者酶切后跑电泳观察其情况。
开始新的学习!
10楼2009-07-14 15:01:49
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