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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教一个关于ELISA出现假阳性的问题
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winnie1991

银虫 (小有名气)

[求助] 请教一个关于ELISA出现假阳性的问题 已有2人参与

本人新手，做ELISA发现出现假阳性，那如果设置空白对照，是否可以通过减去空白对照的值得到真实的结果？
举例：
实验目的：双抗夹心法测抗原浓度
实验结果：
实验组：包被捕获抗体-抗原-酶标抗体 OD450=1.2
空白对照1：无包被蛋白-抗原-酶标抗体 OD450=0.4
空白对照2：包被捕获抗体-无抗原-酶标抗体 OD450=0.3
包被捕获抗体-抗原-酶标抗体的实际吸光值为=1.2-0.4-0.3=0.5

请问可以通过这样的数据处理排除高背景对真实结果的影响，从而证明真实的吸光度是0.5吗？如果不可以的话，原因是什么？@wizardfan
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1楼 2020-06-24 11:32:00
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junjieshao

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2020-06-27 04:34:05
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lksuccess

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

根据自己理解实验组真实吸光度为：1.2-0.3=0.9 即平行对照是空白对照2；空白对照1不合理，不需要。 如果已知抗原浓度，可以倍比稀释成多个浓度，作个标准曲线，然后根据曲线可测抗原的未知浓度。如果待测抗原浓度太高，超过线性范围，可以在测定稀释后的浓度，再乘回去稀释倍数。
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3楼2020-08-01 21:18:58
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winnie1991

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lksuccess at 2020-08-01 21:18:58
根据自己理解实验组真实吸光度为：1.2-0.3=0.9 即平行对照是空白对照2；空白对照1不合理，不需要。 如果已知抗原浓度，可以倍比稀释成多个浓度，作个标准曲线，然后根据曲线可测抗原的未知浓度。如果待测抗原浓度太 ...

为什么空白对照1不合理呢？
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4楼2020-09-24 17:25:14
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