|
|
现在遇到了一个问题，就是通过提取总蛋白检测转基因种子GFP含量，结果发现非转基因种子与转基因种子的GFP含量几乎一样多。
通过紫外照射已经确定非转基因种子不含GFP，而转基因种子含有GFP。并且差异明显。
是不是蛋白提取过程中有问题？
我的方法是
Protein extraction buffer = 1M Tris, 5mM EDTA, 0.1% SDS + Proteinase inhibitors
1，把种子（大豆种子）放到离心管里，然后加入蛋白提取液，冰箱4度过夜。
2，第二天用研磨杵充分研磨，同时再加入等量蛋白提取液。
3，然后95度水浴20分钟。
4，之后离心15分钟，取上清，再离心15分钟。
5，最后取上清，得到蛋白液。
然后分别测总蛋白和GFP含量。最后得到GFP和总蛋白的比。
GFP测量用光谱仪，总蛋白测量用bradford。。
但是不仅仅是比很接近，连测出来的总蛋白和GFP的数值也很接近。
重复了好多次都是这个问题，和老板说过几次，但是老板不认为这个方法有问题。
请问具体问题在哪里？？？ |
» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有17人回复
-
考博求助
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有10人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有9人回复
|
回复此楼