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kasuoliluo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【交流/求助】求助切胶回收蛋白

请问列位高手:
     我用SDS-PAGE分离大豆蛋白的亚基,考染后想回收条带中的蛋白,该如何操作,查了一下资料有用电洗脱仪的,具体的原理是什么呢,如果没有电洗脱仪又该如何是好?

[ Last edited by amisking on 2010-1-7 at 20:16 ]
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cpn

木虫 (正式写手)


kasuoliluo(金币+1):谢谢参与
没有电洗脱仪,看过有把胶捣碎了,脱色,用buffer浸泡个几个小时,然后离心取上清液的。
其实偶也很想具体过程怎么做的。
2楼2010-01-07 19:46:11
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刘超_2009

新虫 (小有名气)


kasuoliluo(金币+1):谢谢参与
一楼说直接捣碎,这样是不是有点盲目性啊,是不是先要切胶啊,获取后再做处理,这样量上要简单些吧,也避免不必要的繁琐
3楼2010-01-08 09:39:09
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cpn

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 刘超_2009 at 2010-1-8 09:39:
一楼说直接捣碎,这样是不是有点盲目性啊,是不是先要切胶啊,获取后再做处理,这样量上要简单些吧,也避免不必要的繁琐

不好意思,偶忘了说要把跑胶染色后的目的条带要切下来这个说一下了~~
4楼2010-01-08 10:40:53
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GinTonic

金虫 (小有名气)


kasuoliluo(金币+1):谢谢参与
楼主可以这样试下,把你的目的蛋白切下放在透析袋里,加入running buffer,然后将袋子适度固定于电泳槽的内槽,加上电压,跑胶,最终将蛋白从胶上跑出
5楼2010-01-08 13:16:48
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qingzi8575

银虫 (正式写手)


kasuoliluo(金币+1):谢谢参与
buffer直接浸泡也可以,20-30小时
6楼2010-01-08 16:45:10
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