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hjhw9513木虫 (著名写手)
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[转贴]关于Red重组系统的简介及其载基因敲除中应用
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已搜索，无重复。来自dxy. 伴随着分子生物学的发展,一种基于λ噬菌体Red 重组酶的同源重组系统已应用于大肠杆菌基因工程研究。Red 重组系统由三种蛋白组成: Exo 蛋白是一种核酸外切酶,结合在双链DNA 的末端,从5′端向3′端降解DNA ,产生3′突出端;Beta 蛋白结合在单链DNA 上,介导互补单链DNA 退火;Gam 蛋白可与RecBCD 酶结合,抑制其降解外源DNA 的活性。Red 同源重组技术具有同源序列短(40～60 bp) 、重组效率高的特点。这种技术可在DNA 靶标分子的任意位点进行基因敲除、敲入、点突变等操作,无需使用限制性内切酶和连接酶。此外,这种新型重组技术可直接将目的基因克隆于载体上,目的基因既可来源于细菌人工染色体也可是基因组DNA。Red 同源重组技术使难度较大的基因工程实验顺利进行,大大推动功能基因组研究的发展。 |
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