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WB阳性对照如何用蛋白标准品配置上样溶液？
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如题，最近想验证两支一抗，由于之前用该一抗直接孵动物组织提取液没能曝出条带，这次想加一孔蛋白标准品作为阳性对照。 1、我的动物组织提取是用RIPA+cocktail裂解，loading buffer和ddH2O调浓度，用蛋白标准品的话也是一样加这些溶液吗？ 2、还需要100℃金属浴10min吗？ 3、动物组织最后是按总蛋白50ug来上样的，那这个蛋白标准品加多少合适？我看有文献中用了ng或pg级，还望高人指点清楚orz |
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