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ansrang

木虫 (小有名气)

[交流] pH5.5的色谱磷酸缓冲液怎么配?

请问做反向色谱时候要求20mM的磷酸盐缓冲液(pH5.5)怎么配?查到书上都没有能配到pH5.5 的磷酸盐缓冲液呢? 用钠盐和钾盐有区别吗,我指的是对做色谱有没有什么影响?

[ Last edited by amisking on 2009-7-11 at 15:00 ]
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kk8993011

新虫 (初入文坛)

★ ★
ansrang(金币+2,VIP+0): 7-13 17:03
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)

试剂: NaH2PO4·2H2O     Na2HPO4·12H2O

配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)

pH   0.2mol/L NaH2PO4(ml)   0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7           93.5                       6.5

5.8           92.0                       8.0

5.9           90.0                     10.0

6.0           87.7                     12.3

6.1           85.0                     15.0

6.2           81.5                     18.5

6.3           77.5                     22.5

6.4           73.5                     26.5

6.5           68.5                     31.5

6.6           62.5                     37.5

6.7           56.5                     43.5

6.8           51.0                     49.0

6.9           45.0                     55.0

7.0           39.0                     61.0

7.1           33.0                     67.0

7.2           28.0                     72.0

7.3           23.0                     67.0

7.4           19.0                     81.0

7.5           16.0                     84.0

7.6           13.0                     87.0

7.7           10.5                     89.5

7.8             8.5                     91.5

7.9             7.0                     93.0

8.0             5.3                     94.7
2楼2009-07-12 19:45:52
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

20年都没见过有用pH5.5 磷酸盐缓冲液的。
还有缓冲能力吗?
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2009-07-13 08:55:44
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