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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 培养基凝固不好，求大佬帮忙解答！
汕头大学海洋科学接受调剂
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酢乙女爱

新虫 (初入文坛)

[求助] 培养基凝固不好，求大佬帮忙解答！ 已有2人参与

培养基凝固不好，不是琼脂的问题，因为别的配方的都凝的很好。碳源是是海藻酸钠，微凝后，倒置一夜，培养基上还是有一堆水珠，画线时划破培养基，坑坑洼洼的，没法拍照。请问有没有大佬知道这是什么原因。

@天使托 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2020-05-31 15:57:48
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李彪5241

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一是琼脂使用量不合适，二是倒平板时气泡太多，三是在冷却时没有及时侧开培养皿的盖子，导致热水气没有挥发出去，四是培养基没有及时倒入平板，有些是凝固的了
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只要有心，没什么是做不到的
2楼2020-06-01 08:26:22
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小阿尔

新虫 (小有名气)
坑坑洼洼是气泡吧？前面的同学说的有道理，气泡和水汽凝结晾不干是常见的。另外容易划破排除培养基，那就考虑厚度和手法

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3楼2020-06-03 00:37:08
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陆封肆闭

至尊木虫 (著名写手)
ph值偏低吗？ph低也会影响凝固效果。

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4楼2020-06-03 14:25:14
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dreamzhang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

水珠的问题是培养基倒入平板后，冷却的时候没把热汽排干。
划破培养基可能是因为你的培养基琼脂含量太高了，也可能是你使用的工具或者划线技术问题。
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5楼2020-06-04 09:09:08
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芒果好吃的嘞

新虫 (小有名气)
有可能是你倒培养基的时候培养基太凉已经有些微微凝固了，倒入培养皿后要等培养基完全凝固以后才可倒置，不然效果也不好；容易划破排除培养基，可能是培养基厚度太小划板力度太大造成的
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6楼2020-06-04 15:17:57
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酢乙女爱

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 陆封肆闭 at 2020-06-03 14:25:14
ph值偏低吗？ph低也会影响凝固效果。

ph为7.0-7.5，感觉也不算低

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7楼2020-06-09 21:52:20
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酢乙女爱

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 李彪5241 at 2020-06-01 08:26:22
一是琼脂使用量不合适，二是倒平板时气泡太多，三是在冷却时没有及时侧开培养皿的盖子，导致热水气没有挥发出去，四是培养基没有及时倒入平板，有些是凝固的了

琼脂含量尝试了1.5%-2%，甚至还试过加更多。我会考虑您提出的第2 3点建议，感谢

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8楼2020-06-09 21:55:07
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guoran01

新虫 (小有名气)
有没有测过灭菌后的pH，有的培养基灭菌前后pH差距很大，如果灭菌后pH过低或过高都不利于凝固。另外不知道你的琼脂是直接加进去灭菌还是加热融化后灭菌的，如果是直接加的粉，灭菌后可能琼脂会集中在下层，需要在没有凝固前再摇匀，否则直接倒平板上层培养基琼脂量很少可能凝固不好。培养基温度过高倒平板就很容易产生很多冷凝水，可以在超净台内打开皿盖吹30分钟左右，吹干表面的水分即可

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9楼2020-06-10 09:38:01
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