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flyever2012

木虫 (正式写手)

[求助] 色谱条件流动相咨询已有5人参与

“The mobile phase was methanol-buffer solution (containing 50mmol/L NaAc/HAc, pH= 3.5) (v/v = 40/60) with the flow rate of 1 ml/min
The UV wavelength was set at 254 nm”
这里的色谱条件甲醇是流动相A,醋酸钠缓冲液是流动相B的意思吗?
并且是按照A流动相0.4ml/min,B流动相0.6ml/min的流速进行进样吗?
此外这里的缓冲液是如何配置的呢?
非常感谢了!
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liuyang9

禁虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
flyever2012: 金币+5, 有帮助 2020-06-01 13:33:15
本帖内容被屏蔽

2楼2020-05-28 22:45:24
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flyever2012

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuyang9 at 2020-05-28 22:45:24
是的,甲醇的比例为40%,水溶液50mmol/L NaAc/HAc, pH= 3.5比例为60,在总流速为1mL/min的条件下,甲醇的流速为0.4mL/min,水溶液50mmol/L NaAc/HAc, pH= 3.5流速为0.6mL/min,甲醇不用配置,缓冲液按照浓度比例就配 ...

非常感谢!
这里的浓度50mmol/L ,是醋酸钠和醋酸分别都是这个浓度的量进行称取吗?
最后调pH是有的HCl或NaOH吗?
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3楼2020-05-29 09:27:22
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郏军建

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
flyever2012: 金币+2, 有帮助 2020-06-01 13:33:32
个人感觉这个流动相是methanol : buffer = 40 : 60. (400mL甲醇加600mL缓冲液,混合)
its better to burn out than to fade away
4楼2020-05-29 13:44:33
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suyanmeng

捐助贵宾 (正式写手)


A是甲醇,B是50mmol/L的乙酸钠,用乙酸调ph到3.5,A:B=40:60,流速1ml/min,苏州格锐思生物为你提供参考

发自小木虫IOS客户端
5楼2020-05-30 06:55:25
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zxm1906

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
flyever2012: 金币+8, ★★★很有帮助 2020-06-01 13:32:42
个人见解,各位同行批评指正
首先,甲醇缓冲溶液证明这是一个相,甲醇和盐溶液是要混合在一起的。
取1000ml水加入50mmol的醋酸钠,溶解后加入醋酸调节pH至3.5,量取该盐溶液600ml与400ml甲醇混匀  ,抽滤脱气即可。
由于是一个相,流速即是1ml/min
一般写多个相都会写mobile A。。mobileB这样吧
6楼2020-05-31 14:56:57
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lisize

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

zxm1906 楼主是一种方式,在HPLC的具有在线脱气功能前提下,先将水相(50mmol/L的乙酸钠水溶液)超声脱气。放在仪器两个通道,比例为 40 : 60,流速为1.0min/ml,也是一种常用方式。
路漫漫其修远兮,吾将上戏而求索
7楼2020-06-03 15:36:38
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紫筱枫影

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

6楼是对的,其他是错的。
预混是一种非常实用的方法,老外都爱这么搞。老外还爱把梯度搞成100%的A过渡到100%的B。
觉得预混没用,可以直接AB相混的,怕是没有吃过亏。
8楼2020-06-04 11:48:03
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