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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 上海生工RNAase A 配制出现的奇怪现象
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lxjwishes

银虫 (正式写手)

[交流] 上海生工RNAase A 配制出现的奇怪现象

这两天实验室大量提取DNA
买了上海生工RNAase A
配制的时候按照植物基因工程附录
用10mmol的tris-cl (PH=7.5),15mmolNaCl缓冲液配制缓冲液
溶解了25mg酶，配制成10mg/ml的工作液
分装后沸水浴10min后
居然出现了一大团絮状物，重复一次后还是一样
不知道怎么回事
浪费了药品
也用不了
请各位高人指教

[ Last edited by amisking on 2009-7-10 at 21:04 ]
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pleasemywings,flymeaway.
1楼 2009-07-10 21:00:22
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zplipeng

金虫 (著名写手)
不懂啊
顶起。。。
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
2楼2009-07-10 21:39:30
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hnzst

金虫 (小有名气)
RNAase A 变性了。
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3楼2009-07-10 21:53:36
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
联系生工啊,估计应该会补偿你一支新酶.
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4楼2009-07-13 09:47:21
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feitiannongying

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
貌似配方不太对啊.我用的配方：将 RNase A 溶解在 0.001mol/l 醋酸钠 (ph5.2) 中 , 使终浓度为 10mg/ml, 加热到 100°C ,15min. 室温下缓慢冷却 , 用 0.1 体积的 1M 的 Tris-Cl 调整 pH 至 7.4 后 , 小管分装保存在 -20°C .
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5楼2009-07-13 09:52:16
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wawayu0916

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要不就买天泽的RNAase A，买来就可以用了，不用配！
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6楼2009-07-13 12:55:21
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0):支持一下！ 7-13 21:03
我也见过别人配成这样的，可能是配的方法不对，我们用同样的试剂再配一遍就没出现过这种现象
我前几天还配了：100mg RNase溶于10ml 10 m mol/L Tris.Cl (PH7.5), 15m mol/NaCl中，于100度加热15min,缓慢冷却（我们当时是加热完后就让它在不再加热的100度水中自行慢慢冷却，没有拿出来，第二天才分装保存的）
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7楼2009-07-13 21:00:53
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lxjwishes

银虫 (正式写手)
多谢各位赐教
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pleasemywings,flymeaway.
8楼2009-08-05 10:30:40
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