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soarshining

捐助贵宾 (著名写手)

[求助] 请问如何保持2-△△Ct比出来的比值在重复实验中稳定?

最近qpcr遇到了难题,老板要求qpcr结果不仅显著性要能重复,而且诱导目的基因mrna增加的倍数也要稳定。想问大家,这个表达增加的倍数在同种刺激下是稳定的吗?

比如我加了抑制剂处理24 h,第一次qPCR发现目的基因相对Ctrl组(DMSO组)增加了10倍,第二次重复却增加了60倍,虽然都有显著性但是这个倍数是不一样的。以前qPCR从来没有关注过倍数,都是算完p值就下结论了。想请教这个可以稳定吗?
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