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gss8285

铜虫 (小有名气)

[交流] 怎么把二抗洗下来?

我的一抗是兔抗人血管内皮因子-2多克隆抗体,二抗是羊抗兔罗丹明B标记的IgG,现在想把二抗洗下来测荧光强度,不知道用什么能洗下来,还请各位虫友指教!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

TBST多洗几次,比如洗个半小时,但无法保证能够洗得干净
2楼2009-07-10 10:27:44
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gss8285

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-7-10 10:27:
TBST多洗几次,比如洗个半小时,但无法保证能够洗得干净

本人是学药化的,对生物这方面不是特别清楚。请问TBST是直接买的还是可以自己配置?
谢谢!
3楼2009-07-10 10:31:53
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fkbp23

木虫 (小有名气)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎交流! 7-10 12:45
TBS
Tris  50mM
NaCl 150mM   
用稀盐酸调pH值至7.5,室温保存。

TBST是在TBS中按1:1000(体积比)加入Tween 20.
4楼2009-07-10 10:51:24
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

如果不想自己配制,也可以跟公司买TBS干粉,就是他们帮你称好放在一个袋子里面,然后开封加水溶即可
使用前加0.1%的Tween 20
5楼2009-07-10 11:00:56
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gss8285

铜虫 (小有名气)

还有别的方法吗?因为我们实验室没有Tris.根据蛋白盐析原理用Nacl溶液洗行吗?
6楼2009-07-10 11:14:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎交流! 7-10 12:45
tris其实是维持pH环境的~~~
Tris碱很便宜啦,我们都是论公斤买的~~
据说用水洗也是可以的,不过,离子强度也是应该考虑的问题
非必要情况下不要擅改配方
7楼2009-07-10 11:30:12
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