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sgba0307

铁虫 (小有名气)

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[交流] pcr产物回收后无条带

我pcr扩增的片段大小为90bp，pcr产物较亮较宽，电泳后切胶用回收试剂盒回收后跑电泳没有任何条带，操作绝对无误，请问到底是怎么回事？已经回收2次了还是什么都没有，要绝望了，请高手给予解答，谢谢！

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1楼 2009-07-10 10:13:56

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bingdong05

银虫 (正式写手)

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性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

怀疑试剂盒的问题，最好换一个新的试剂盒或品牌试试，小片段不好回收的；还有一个可能的原因就是因为片段太小了，再加上回收过程中的造成的损失，可能电泳条带是有的但是看不到（以前碰到过这种情况，当时是75bp，用玻璃珠回收，电泳也是看不到，就根据marker的位置大体估计下条带如果有可能出现的位置，割胶，回收，链接，转化，最后发现得到目的转化子），建议楼主也碰下运气试试，因为条带在胶上的亮度除于浓度有关外，还与条带的大小有关，即同样浓度下，条带愈小，亮度愈暗。