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stfo

铜虫 (小有名气)

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[交流] pET28测序问题

在pET28a的EcoRI and HindIII间加入外源基因，几次送去测序，都告诉我“样品用引物T7TER测序检测不到信号“，然而从结果上看另一端的测序结果是对的？公司建议我单向测通

这是怎么回事？以前没遇到过呀

高人赐教

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1楼 2009-07-10 08:43:00

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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

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首先我不明白为什么没信号你还说“从结果上看另一端的测序结果是对的”？
没信号应该是没有测序报告才对！
建议你换个公司测
测序质量我认为金思特<生工<宝生物（江浙沪地区，价格呈反比）
测通纯粹是为了骗你的钱 PET还需要测通吗汗

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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！

2楼2009-07-10 09:49:03

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stfo

铜虫 (小有名气)

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当时我是测了正反两个反应，一个有结果一个没信号
测2个反应主要是想看看序列有没有问题，1个反应测不全

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3楼2009-07-10 10:35:34

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susizheng

木虫 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

这个应该是公司的问题。
另外表达载体都构建好了，再测就没啥意义了啊。
为啥之前不测呢？

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Thank-you，so-blue.

4楼2009-07-10 10:42:27

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stfo

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目的片断连到T载体上后测过一次，没问题

然后切下来连pET，连了几次都没成功，最近好像连上了2了，提质粒后两个质粒大小不一样，但是正向测序结果表明都含有我的目的片断，奇怪的是反向两个都测不出来，被弄糊涂了

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5楼2009-07-10 10:47:59

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