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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 我现在做的是western实验 可是marker却转不上
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muzili8002

[交流] 我现在做的是western实验 可是marker却转不上

我现在做的是western实验 可是marker却转不上 即使转上了也只有一条带 请问谁能解答一下 谢谢

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-11 at 14:20 ]
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1楼 2009-07-09 20:10:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
jdklgjldg(金币+1,VIP+0): 7-9 22:08
用的什么膜，以及什么转膜条件？
PVDF膜记得先甲醇活化
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2楼2009-07-09 21:25:25
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Yuri2682

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也遇到这类问题，到底考虑什么原因呢？
NC膜，湿转，恒压60V，3h
转膜时间不够吗？
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3楼2009-07-09 22:59:24
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by Yuri2682 at 2009/7/9, 22:59:
我也遇到这类问题，到底考虑什么原因呢？
NC膜，湿转，恒压60V，3h
转膜时间不够吗？

转膜几个因素
分子量、胶的厚度、胶的浓度
其他因素还有温度等

我常用的转膜条件是恒压100V湿转，针对不同分子量和不同胶的厚度调整转膜时间
另外在冰上转，防止蛋白降解
一般100kD的分子量，1.5mm的胶，我转1h
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4楼2009-07-09 23:02:40
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zplipeng

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
学习下，。
还没有遇上这种情况过
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
5楼2009-07-09 23:08:00
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antibody01

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
考虑过Marker的上样量吗？
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生活就像强奸，无法反抗就要学会享受； 工作就像轮奸，你不行就要别人上； 社会就像自慰，一切都要靠自己的双手解决。
6楼2009-07-10 15:33:08
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