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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药品生产 » 生产技术 » 多肽粉末冻干后复溶问题
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csfy888

新虫 (小有名气)

[交流] 多肽粉末冻干后复溶问题

大家好，向大家请教一下：最近在做一个多肽原料药，HPLC制备之后浓缩冻干，得到的蓬松粉末再复溶后溶液呈明显浑浊状态，用0.22μm滤膜过滤后也没有改善！请问这是什么原因造成的呢？是冻干工艺的问题吗？多谢大家了
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1楼 2020-05-18 08:56:40
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舟尘封

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
csfy888: 金币+8, 十分感谢！！！ 2020-05-25 16:26:42
冻干后蓬松的话，说明冻干基本上是ok的，重点关注复溶时的溶剂，最好与制备时的体系一致且浓度接近。
如果排除溶剂因素，还是无法复溶，那就可能是冻干过程的问题。你写道“浓缩冻干”，不知道是不是采用了真空浓缩即旋蒸，如果用到的话，可能就是这方面的问题，因为有些多肽在有机相含量改变或者浓度改变时会形成凝胶，有些凝胶是无法恢复状态的
如果没有用旋蒸，那就是冻干工艺的问题，跟一次降温和二次降温还有最后的复温有关系，如果是挂瓶冻干机的话可能问题不大，如果是平板冻干机的话，需要调整冻干曲线，这个具体我也不大懂。。。。
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14楼2020-05-19 12:11:51
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天涯不归路

版主 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
csfy888: 金币+7, 多谢啦！ 2020-08-20 08:43:30
引用回帖:
23楼: Originally posted by csfy888 at 2020-06-02 09:55:01
冻干参数有哪些需要注意的地方呢？在冻干的时候没加保护剂，一般多肽冻干需要加哪些保护剂呢？多谢啦...

温度过低  冻的过快，升温太高或者过快都有可能。要看你的产品自身稳定性。
常用的冻干保护剂  甘露醇 葡萄糖  海藻糖 山梨醇那些了。
另外冻干过程  你里面加了buffer 可能引起局部的变化也说不定会导致蛋白变性失活
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25楼2020-06-03 13:32:23
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)
★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
引用回帖:
22楼: Originally posted by FMKpeptideF at 2020-05-28 23:56:17
生成聚集体了，估计你是在做目前最大的两个品种

我也猜到是哪个品种了，这个问题在10年前我就已经解决了，其实不难，如果需要技术支持请私信
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26楼2020-08-13 15:37:08
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
csfy888: 金币+3, 十分感谢！！！ 2020-08-20 08:44:47
引用回帖:
14楼: Originally posted by 舟尘封 at 2020-05-19 12:11:51
冻干后蓬松的话，说明冻干基本上是ok的，重点关注复溶时的溶剂，最好与制备时的体系一致且浓度接近。
如果排除溶剂因素，还是无法复溶，那就可能是冻干过程的问题。你写道“浓缩冻干”，不知道是不是采用了真空浓缩 ...

有一部分是正确的，这个品种的多肽冻干其实还是需要一定的技巧的，而且这个冻干解决不好，制剂肯定也做不好，你已经快接近真相了，加油，在研究一下马上就成功了
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27楼2020-08-13 15:42:19
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普通回帖

Sunnie2015

木虫 (知名作家)
★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
沉淀？变性了吧。我有一次冻蛋白，冻干机坏了，反复了两次之后也出现这种问题。

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csfy888
2楼2020-05-18 09:00:36
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csfy888

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Sunnie2015 at 2020-05-18 09:00:36
沉淀？变性了吧。我有一次冻蛋白，冻干机坏了，反复了两次之后也出现这种问题。

那这个该如何解决呢？多谢啦
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3楼2020-05-18 09:06:17
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bsese

至尊木虫 (文坛精英)
★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
祝好！！祝好运连连！！

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6楼2020-05-18 12:30:07
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Sunnie2015

木虫 (知名作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Sunnie2015 at 2020-05-18 09:00:36
沉淀？变性了吧。我有一次冻蛋白，冻干机坏了，反复了两次之后也出现这种问题。

如果没有反复冻融的话可能没有彻底冻成干粉状态。把混浊的离心去除以后再测活性和效价，可能会对活性有影响。

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12楼2020-05-18 18:53:08
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136552540

银虫 (小有名气)
★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
学习

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13楼2020-05-18 22:53:39
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dreamzhang

新虫 (小有名气)
★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
这个是不是变性了。
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15楼2020-05-19 12:22:27
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danghaha

新虫 (文坛精英)
★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
祝顺利

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16楼2020-05-19 12:29:15
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天涯不归路

版主 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
csfy888: 金币+5, 多谢啦！ 2020-06-02 09:53:44
有没有可能HPLC制备的时候就变性了。如果制备过程中没问题，就是冻干工艺要调整。
很有可能冻干参数不合适 导致蛋白变性了  另外冻干的过程有加保护剂吗？
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csfy888
21楼2020-05-26 16:20:18
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FMKpeptideF

银虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
csfy888(金币+2): 谢谢参与
csfy888: 金币+5, 十分感谢！！！ 2020-06-02 09:55:17
生成聚集体了，估计你是在做目前最大的两个品种

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csfy888
22楼2020-05-28 23:56:17
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csfy888

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
21楼: Originally posted by 天涯不归路 at 2020-05-26 16:20:18
有没有可能HPLC制备的时候就变性了。如果制备过程中没问题，就是冻干工艺要调整。
很有可能冻干参数不合适 导致蛋白变性了  另外冻干的过程有加保护剂吗？

冻干参数有哪些需要注意的地方呢？在冻干的时候没加保护剂，一般多肽冻干需要加哪些保护剂呢？多谢啦
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23楼2020-06-02 09:55:01
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csfy888

新虫 (小有名气)
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引用回帖:
22楼: Originally posted by FMKpeptideF at 2020-05-28 23:56:17
生成聚集体了，估计你是在做目前最大的两个品种

我们也猜测可能是发生聚集了，这个应该如何解决呢？方便交流一下么？多谢啦
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24楼2020-06-02 09:56:17
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b39580124楼
2020-05-18 09:41   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
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王西西5205楼
2020-05-18 11:55   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
好
还送到哪看7楼
2020-05-18 12:36   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
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tzynew8楼
2020-05-18 13:05   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
miaojiabing9楼
2020-05-18 15:24   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
guanlianwu10楼
2020-05-18 15:56   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
syhorchid11楼
2020-05-18 18:11   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
youngen17楼
2020-05-20 11:16   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
老年教师18楼
2020-05-21 04:21   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
mikeshen10119楼
2020-05-24 12:12   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
guanlianwu20楼
2020-05-24 14:09   回复  
云在青天28楼
2020-08-13 21:42   回复  
csfy888(金币+2): 谢谢参与
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