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木木宫新虫 (小有名气)
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水解酶活性测试？ 已有1人参与
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嗜热菌接种到发酵培养基中，在合适的条件下培养到Abs600值1.0，4℃下进行离心。上清液用于溶解副球菌。副球菌接种到 LB 培养基中，37 ℃条件下培养72 h，使其达到平台期。副球菌培养液离心后收集菌体，采用新鲜的Tris-HCl缓冲液重悬，并将 Abs540调整到1.4。细胞悬浮液与芽孢上清液等体积混合，60 ℃水浴水解。在540 nm处测定细胞悬浮液的吸光度。 请问有没有懂这段话的，60摄氏度水解是干嘛的？吸光度测得是什么呢？ 发自小木虫IOS客户端 |
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minime86
木虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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应该是在60度时进行嗜热菌溶解副球菌实验。吸光度测的是微生物细胞浓度。 参考以下文献内容：“2.0mL 嗜热菌培养上清液(或 Tris-HCl 缓冲溶液)与 2.0mL 待溶胞微生物菌悬液混合(混合液 OD540控制在0.6~0.7,总体积为4.0mL)后,60℃水浴 保温,并定期测定 OD540.缓冲溶液与菌悬液的混合 液作为对照,根据吸光度变化判断溶胞情况” 宋玉栋, 胡洪营, and 李鑫. "嗜热溶胞土芽孢杆菌 (Geobacillus sp.) SY-9 的基本特性." 中国环境科学 27, no. 4 (2007): 0-0. |
2楼2020-05-18 05:30:37