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cjl2003

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【新手求助】如何用比色法做中药中大类成分的定量分析

各位哥哥姐姐们，由于本人刚开始课题，有一前面毕业的师兄留下来的中药有效部位，我要做成剂型，所以想做一下里面含有的大类成分的含量，因为规定50%以上才有实验意义（好像是吧，做剂型需要80%以上），想到用比色法来做定量，看里面的主要成分总共占，但是不知道该怎么做，恳请大家帮助，万分感谢！

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1楼 2009-07-09 09:44:17

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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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专业: 抗肿瘤药物药理

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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 8-6 23:41

比色法
通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。早在公元初古希腊人就曾用五倍子溶液测定醋中的铁。1795年，俄国人也用五倍子的酒精溶液测定矿泉水中的铁。但是，比色法作为一种定量分析的方法，大约开始于19世纪30～40年代。
　　以生成有色化合物的显色反应为基础，通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。比色法作为一种定量分析的方法，开始于19世纪30～40年代。比色分析对显色反应的基本要求是：反应应具有较高的灵敏度和选择性，反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定，它和显色剂的颜色差别较大。选择适当的显色反应和控制好适宜的反应条件，是比色分析的关键。
　　常用的比色法有两种：目视比色法和光电比色法，两种方法都是以朗伯-比尔定律[1](A＝εbc)为基础。常用的目视比色法是标准系列法，即用不同量的待测物标准溶液在完全相同的一组比色管中，先按分析步骤显色，配成颜色逐渐递变的标准色阶。试样溶液也在完全相同条件下显色，和标准色阶作比较，目视找出色泽最相近的那一份标准，由其中所含标准溶液的量，计算确定试样中待测组分的含量。
　　光电比色法是在光电比色计上测量一系列标准溶液的吸光度，将吸光度对浓度作图，绘制工作曲线，然后根据待测组分溶液的吸光度在工作曲线上查得其浓度或含量。与目视比色法相比，光电比色法消除了主观误差，提高了测量准确度，而且可以通过选择滤光片来消除干扰，从而提高了选择性。但光电比色计采用钨灯光源和滤光片，只适用于可见光谱区和只能得到一定波长范围的复合光，而不是单色光束，还有其他一些局限，使它无论在测量的准确度、灵敏度和应用范围上都不如紫外-可见分光光度计。20 世纪30～60年代，是比色法发展的旺盛时期，此后就逐渐为分光光度法所代替。